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應用綠色熒光蛋白基因標記細菌進行生物膜結構定量化新方法
綠色熒光蛋白基因pEGFP經CaCl2轉化法標記E.coli JM109菌株,獲得的標記菌株作為模式細菌接種含50μg/mL氨芐的LB培養基,在搖瓶中與火山巖顆粒共混培養掛膜(37℃,120 r/min,16 h).用激光共聚焦掃描顯微鏡攝取獲得火山巖填料生物膜250μm×250μm區域不同層面的圖片堆,所獲圖片堆經COMSTAT程序處理可以獲得相關的定量化參數,如16 h生物膜平均厚度為0.120 844 μm,生物膜最大厚度為10.5μm,生物膜體積為0.136 986μm3/μm2,生物膜表面積21 338.1μm2,生物膜比表面積為3.36 854μm2/μm3.該方法也可以擴展至其他綠色熒光蛋白基因標記細菌的生物膜結構定量化.
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