多重聚合酶鏈反應(yīng)-毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光法檢測(cè)三種食源性致病菌

多重聚合酶鏈反應(yīng)-毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光法檢測(cè)三種食源性致病菌

建立了食品中常見(jiàn)致病菌大腸桿菌O157:H7的uidA基因、沙門(mén)菌的invA基因和志賀菌的ipaH基因的多重聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)產(chǎn)物的毛細(xì)管電泳快速檢測(cè)方法.根據(jù)這3種致病菌的特異性基因序列設(shè)計(jì)多重PCR引物,優(yōu)化PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系,采用7.0 g/L甲基纖維素為篩分介質(zhì),毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)法同時(shí)檢測(cè)了3種常見(jiàn)致病菌的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物.在優(yōu)化的多重PCR反應(yīng)和毛細(xì)管篩分電泳條件下,該方法可以同時(shí)檢測(cè)沙門(mén)菌、志賀菌和大腸桿菌O157:H7基因的多重PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,22 min內(nèi)即可完成3種常見(jiàn)致病菌的毛細(xì)管電泳檢測(cè).遷移時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.47%～2.07%.與凝膠電泳法比較,該法簡(jiǎn)便快速,靈敏度高,可用于多種致病菌脫氧核糖核酸的檢測(cè),為食品安全提供了一種可靠的快速檢測(cè)方法.

作 者： 毛紅霞 黎源倩 裴曉方 何超 渠凌麗 MAO Hongxia LI Yuanqian PEI Xiaofang HE Chao QU Lingli   作者單位： 四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院,四川,成都,610041  刊 名： 色譜  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY  年，卷(期)： 2007 25(4)  分類(lèi)號(hào)： O658  關(guān)鍵詞： 多重聚合酶鏈反應(yīng)   毛細(xì)管電泳法   激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)   食源性致病菌  

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