Bcl-2基因轉(zhuǎn)染對骨髓間充質(zhì)干細胞體外模擬缺血性損傷保護作用的實驗研究

Bcl-2基因轉(zhuǎn)染對骨髓間充質(zhì)干細胞體外模擬缺血性損傷保護作用的實驗研究

目的 觀察Bcl-2基因轉(zhuǎn)染對骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)體外模擬缺血性損傷的保護作用,從而為下一步Bcl-2基因修飾的MSCs移植治療腦缺血的實驗研究奠定基礎(chǔ).方法 采用密度梯度離心結(jié)合貼壁法分離、培養(yǎng)大鼠MSCs,對培養(yǎng)第5代的MSCs進行鑒定;用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法對MSCs行人Bel-2(hBcb2)基因轉(zhuǎn)染,轉(zhuǎn)染后用G418進行篩選,然后用免疫熒光細胞化學(xué)技術(shù)檢測其蛋白的表達;采用血清剝奪和缺氧(SOD)處理建立MSCs體外模擬缺血性損傷模型,通過流式細胞術(shù)和TUNEL原位細胞凋亡檢測評價轉(zhuǎn)染hBcl-2基因的MSCs和未轉(zhuǎn)染的MSCs的凋亡及存活情況.結(jié)果 密度梯度離心結(jié)合貼壁法能有效分離、純化大鼠MSCs,免疫組化檢測顯示培養(yǎng)的細胞CD44、CD71表達陽性,而CD45表達陰性;轉(zhuǎn)染hBcl-2基因的MSCs經(jīng)G418篩選后有hBd-2蛋白的穩(wěn)定、高效的表達;流式細胞術(shù)檢測顯示和MSCs相比,轉(zhuǎn)染hBcb2基因的MSCs在SOD后及9h凋亡細胞較少,存活細胞較多.TUNEL原位細胞凋亡檢測也顯示轉(zhuǎn)染hBcl-2基因的MSCs的凋亡明顯減少(P<0.05).結(jié)論 轉(zhuǎn)染hBcl-2基因的MSCs有其蛋白的穩(wěn)定表達,hBcl-2基因轉(zhuǎn)染可對抗MSCs體外模擬缺血性損傷引起的細胞凋亡,從而具有保護性作用.

作 者： 張小喬 梅元武 張紅 鄭麗芳 郭遠瑾 徐江華   作者單位： 張小喬(鄖陽醫(yī)學(xué)院附屬十堰市太和醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科)

梅元武,張紅,鄭麗芳,郭遠瑾,徐江華(華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,武漢,430022) 

刊 名： 卒中與神經(jīng)疾病  ISTIC 英文刊名： STROKE AND NERVOUS DISEASES  年，卷(期)： 2008 15(3)  分類號： Q813 R743  關(guān)鍵詞： Bcl-2   基因轉(zhuǎn)染   骨髓間充質(zhì)干細胞   缺血性損傷   保護作用  

【Bcl-2基因轉(zhuǎn)染對骨髓間充質(zhì)干細胞體外模擬缺血性損傷保護作用的實驗研究】相關(guān)文章：

模擬經(jīng)營實驗報告09-02

靜電實驗研究實驗報告09-04

第二節(jié) 基因在親子代間的傳遞教案04-25

他剛考上研究生 捐干細胞救13歲娃04-25

模擬文件管理實驗報告09-19

期貨交易模擬實驗心得06-14

王充名言名句07-11

深入骨髓的經(jīng)典說說03-17

刻入骨髓的情侶簽名11-03

研究透鏡實驗課教學(xué)反思04-28