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HBV前S2蛋白單克隆抗體的制備和生物學特性的鑒定
目的克隆表達HBV前S2蛋白,用純化的重組蛋白GST-S2免疫BALB/C小鼠,通過雜交瘤技術制備抗HBV前S2蛋白的單克隆抗體(mAb),并鑒定其特性.方法利用含雙拷貝乙肝病毒adw2亞型基因全序列的質粒pEcob6,經PCR方法擴增出HBV前S2片段,在GST表達系統中表達,表達產物用谷胱甘肽親和層析純化后,用于免疫BALB/c小鼠,采用雜交瘤技術制備抗前S2蛋白的mAb,采用間接ELISA方法和Western blot進行mAb特異性鑒定;同時采用間接ELISA方法鑒定mAb相對親和力.結果獲得一株可分泌特異性mAb的雜交瘤細胞7A6;相對親和力均在107以上.Western blot顯示該株mAb能特異識別重組前S2蛋白.結論成功地制備出抗HBV前S2蛋白的一株mAb.
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