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3種結腸癌細胞株中DLC-1基因的表達及其啟動子區的甲基化狀態研究
目的:研究候選抑癌基因DLC-1在結腸癌細胞株中的表達及其啟動子區的甲基化狀態,初步探討結腸癌細胞株DLC-1基因表達水平與其啟動子區甲基化的相關性.方法:采用RT-PCR技術分別檢測DLC-1基因在人結腸癌細胞株CaCo-2、HT-29和LoVo中的表達水平;應用甲基化特異性PCR(MSP)方法和亞硫酸氫鹽修飾DNA測序檢測啟動子區域甲基化狀態;分別用0、5、10 μmol·L-1濃度的去甲基化藥物5氮雜胞苷處理DLC-1基因啟動子區域高甲基化狀態細胞后,再檢測DLC-1基因mRNA表達水平.結果:人結腸癌細胞株CaCo-2和LoVo中DLC-1 mRNA呈陽性表達,HT-29中的表達呈陰性表達;CaCo-2和LoVo細胞DLC-1基因啟動子區域未發生甲基化,而HT-29出現啟動子區高甲基化狀態;經5氮雜胞苷藥物干預后,HT-29結腸癌細胞的DLC-1基因表達明顯增強.結論:結腸癌細胞株HT-29中DLC-1基因表達沉默與啟動子區高甲基化狀態有關.
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