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抗P185工程抗體表達與純化研究
人類的原癌基因Her-2編碼一個185kDa的跨膜受體酪氨酸激酶,也稱為p185,是腫瘤相關蛋白,在多種癌細胞,特別在乳腺癌中有高表達.構建了抗p185/HER-2的二價的嵌合抗體(scFv-Fc),并證明其保留了親本抗體的特異結合活性,進而建立了高表達的細胞株.對該嵌合抗體進行滾瓶大規模培養,并對培養產物的純化條件進行了摸索,建立了親和層析和陽離子交換層析兩步法.最終產物的純度在95%以上,回收率為63%.摸索了嵌合抗體的凍干保存條件,抗體可以保持其穩定性和結合活性一年以上.嵌合抗體純化工藝和保存條件的確定,為進一步的臨床研究奠定了基礎.
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