- 相關(guān)推薦
喙尾琵甲DNA提取方法比較與AFLP反應(yīng)體系的建立
采用CTAB法、改進(jìn)SDS-蛋白酶K法、SDS-飽和氯化鈉法和提取試劑盒對喙尾琵甲的肌肉、蟲卵和幼蟲進(jìn)行DNA提取,比較了DNA的提取和保存質(zhì)量,并對AFLP試驗(yàn)的酶切時間、預(yù)擴(kuò)增產(chǎn)物稀釋倍數(shù)和選擇性擴(kuò)增引物量等關(guān)鍵因子進(jìn)行試驗(yàn)和優(yōu)化.結(jié)果表明:4種方法對肌肉組織提取的DNA質(zhì)量都較好;3種傳統(tǒng)方法提取的DNA的保存時間長于試劑盒提取的DNA;使用EcoR Ⅰ/Mse Ⅰ內(nèi)切酶組合,10 U EcoR Ⅰ和2 U Mse Ⅰ分兩步各酶切2 h,T4連接酶3 h連接后,以20倍稀釋的預(yù)擴(kuò)增產(chǎn)物和5 ng/35 ng的E+3/M+3引物量進(jìn)行選擇性擴(kuò)增,建立了喙尾琵甲AFLP分子標(biāo)記體系.
作 者： 趙敏 馮穎 和銳 陳曉鳴 冀煥紅 ZHAO Min FENG Ying HE Rui CHEN Xiao-ming JI Huan-hong 作者單位： 中國林業(yè)科學(xué)研究院資源昆蟲研究所,國家林業(yè)局資源昆蟲培育與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南,昆明,650224 刊 名： 林業(yè)科學(xué)研究 ISTIC PKU 英文刊名： FOREST RESEARCH 年，卷(期)： 2010 23(2) 分類號： Q963 關(guān)鍵詞： 喙尾琵甲 基因組DNA DNA提取 AFLP Blaps rhynchopetera genomic DNA DNA extraction AFLP【喙尾琵甲DNA提取方法比較與AFLP反應(yīng)體系的建立】相關(guān)文章：
菠蘿DNA的提取及AFLP反應(yīng)體系的建立04-27
一種適合AFLP分析的柑橘DNA提取方法04-27
快速微量提取番茄DNA及SSR-PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化04-29
龍眼基因組DNA提取及RAPD反應(yīng)體系優(yōu)化的研究04-29
紅曲菌基因組DNA提取及RAPD反應(yīng)體系優(yōu)化04-26
小麥光腥黑粉菌冬孢子總DNA提取方法比較04-27
丹參SRAP反應(yīng)體系的建立與優(yōu)化04-26
天牛基因組DNA的提取方法04-30