嗜酸乳桿菌推定的β-半乳糖苷酶基因在大腸桿菌中的功能性表達(dá)

時間:2023-05-02 22:16:26 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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嗜酸乳桿菌推定的β-半乳糖苷酶基因在大腸桿菌中的功能性表達(dá)

目的 在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)以嗜酸乳桿菌克隆β-半乳糖苷酶基因lacZ,為研究其酶學(xué)特性做準(zhǔn)備.方法 從嗜酸乳桿菌ATCC 4356中克隆lacZ基因,并構(gòu)建表達(dá)載體pET22b-lacZ-H、pQE31-H-lacZ和pQE31-lacZ,然后在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá),并測定表達(dá)產(chǎn)物的β-半乳糖苷酶活性.結(jié)果 無標(biāo)簽的重組嗜酸乳桿菌β-半乳糖苷酶LacZ獲得了功能性表達(dá),表達(dá)量可達(dá)2.28 kU/L.而融合His-Tag的重組嗜酸乳桿菌LacZ卻失去了β-半乳糖苷酶活性,即使復(fù)性也不能恢復(fù).結(jié)論 克隆表達(dá)的成功為該酶的酶學(xué)性質(zhì)研究和可能的應(yīng)用打下了基礎(chǔ).

作 者: 潘渠 胡福泉 陳恬 邱岳 王廣科 李晉川 PAN Qu HU Fu-quan CHEN Tian QIU Yue WANG Guang-ke LI Jin-chuan   作者單位: 潘渠,PAN Qu(成都醫(yī)學(xué)院病原教研室,成都,610083;第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部微生物學(xué)教研室,重慶,400038)

胡福泉,HU Fu-quan(第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部微生物學(xué)教研室,重慶,400038)

陳恬,邱岳,王廣科,李晉川,CHEN Tian,QIU Yue,WANG Guang-ke,LI Jin-chuan(成都醫(yī)學(xué)院病原教研室,成都,610083) 

刊 名: 成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報  英文刊名: JOURNAL OF CHENGDU MEDICAL COLLEGE  年,卷(期): 2009 4(2)  分類號: Q786  關(guān)鍵詞: 嗜酸乳桿菌   β-半乳糖苷酶   克隆表達(dá)   His-Tag   復(fù)性  

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