斑馬魚(yú)促性腺激素釋放激素基因的克隆與表達(dá)

斑馬魚(yú)促性腺激素釋放激素基因的克隆與表達(dá)

目的 克隆斑馬魚(yú)促性腺激素釋放激素(GnRH)基因,構(gòu)建重組質(zhì)粒pQE30-GnRH并獲得表達(dá)蛋白.方法 從斑馬魚(yú)腦組織提取總RNA,應(yīng)用RT-PCR方法獲得斑馬魚(yú)GnRH cDNA.將該cDNA插入質(zhì)粒pQE30中,并使其在大腸桿菌RB791中表達(dá).經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后SDS-PAGE電泳檢測(cè)蛋白的表達(dá)情況.結(jié)果 斑馬魚(yú)GnRH cDNA長(zhǎng)為207bp,編碼的GnRH前體為69個(gè)氨基酸殘基.與鯉魚(yú)、鯽魚(yú)、擬鯉、黑頭軟口鰷等淡水鯉科魚(yú)類(lèi)的氨基酸序列同源性比較,分別為74.4%,69.8%,73.3% 和 73.3%.電泳結(jié)果顯示一新的分子量約為14.4 kDa的特異蛋白帶.結(jié)論 本研究所克隆的斑馬魚(yú)GnRH基因?qū)儆贕nRH-Ⅱ.構(gòu)建斑馬魚(yú)GnRH原核表達(dá)質(zhì)粒不僅獲得大量的GnRH蛋白,還可對(duì)該蛋白做進(jìn)一步分離純化以及生物活性方面的研究.

作 者： 謝保勝 段瑞君 藤原滋樹(shù) Xie Baosheng Duan Rui Jun Shigeki Fujiwara   作者單位： 謝保勝,段瑞君,Xie Baosheng,Duan Rui Jun(青海大學(xué)生物科學(xué)系)

藤原滋樹(shù),Shigeki Fujiwara(日本高知大學(xué)理學(xué)部) 

刊 名： 青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)  英文刊名： JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE  年，卷(期)： 2009 30(1)  分類(lèi)號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： 斑馬魚(yú)   促性腺激素釋放激素   克隆   基因表達(dá)  

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