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鈣信號在ALA-PDT誘導SW480細胞凋亡及細胞自身保護機制中的作用
背景與目的:腫瘤的光動力療法(photodynamic therapy,PDT)是基于光敏劑選擇性積聚在腫瘤組織中,腫瘤細胞接受可見光照后凋亡或壞死的一種治療方法.細胞內游離鈣作為重要的第二信使參與多種細胞功能的調節,但鈣信號在PDT中的作用卻不甚清楚.本研究的目的是探討鈣信號在δ氨基酮戊酸-光動力學療法(ALA-PDT)誘導SW480細胞凋亡及細胞自身保護機制中的作用.方法:將SW480細胞分為4組:空白對照組、激光照射組、ALA組和ALA-PDT組.用TUNEL法檢測細胞凋亡;用激光共聚焦顯微鏡觀測各組細胞內游離鈣離子濃度的變化;放射免疫法測定各組細胞內cAMP及cGMP含量;半定量逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測各組細胞中鈣調素的基因表達;Western蛋白印跡檢測各組細胞MEK和ERK1/2蛋白產物及磷酸化蛋白產物的表達.結果:TUNEL法顯示ALA-PDT組的人結腸癌細胞在PDT后30 min凋亡指數(apoptosis index,AI)為(25.26±5.04)%,60 min AI為(50.45±7.85)%;激光共聚焦結果為ALA-PDT組細胞內游離鈣離子濃度在10min時熒光強度為100.00±19.83,而20 min時達185.40±18.90(P<0.01),而空白對照組、單獨激光照射組、ALA組細胞內鈣離子濃度無明顯變化;在監測時間內,cAMP含量在30 min時為(3.215±0.245)pmol/L,顯著高于其它各組及各組內不同時相的cAMP含量(P<0.001);空白對照組、激光照射組、ALA組以及ALA-PDT后30 min、60 min、90 min組的CaM3的相對表達量分別為3.97±0.29、4.28±0.39、4.51±0.44、12.60±1.84、11.39±1.13和12.77±1.35,ALA-PDT后30~90 min組的CaM3表達顯著高于空白對照組、激光照射組和ALA組(P<0.001);ALA-PDT后SW480細胞的ERK通路激活.結論:鈣信號對ALA-PDT誘導SW480細胞凋亡起著重要作用,同時也誘導了細胞自身的保護機制--ERK通路激活.
作 者: 鄭江華 時德 趙渝 陳祖林 ZHENG Jiang-Hua SHI De ZHAO Yu CHEN Zu-Lin 作者單位: 鄭江華,時德,趙渝,ZHENG Jiang-Hua,SHI De,ZHAO Yu(重慶醫科大學附屬第一醫院,血管外科/重慶市普外科學重點實驗室,重慶,400037)陳祖林,CHEN Zu-Lin(第三軍醫大學附屬新橋醫院,普外科,重慶,400016)
刊 名: 癌癥 ISTIC PKU 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF CANCER 年,卷(期): 2006 25(6) 分類號: Q27 關鍵詞: 腫瘤 ALA PDT SW480細胞 鈣信號 凋亡【鈣信號在ALA-PDT誘導SW480細胞凋亡及細胞自身保護機制中的作用】相關文章:
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