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黃瓜毛狀根的誘導及細胞分裂素6-BA對其生長和形態(tài)的影響
含農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒pRiA4b的發(fā)根農(nóng)桿菌(Agrobacterium rhizogenes)ATCC15834感染黃瓜子葉外植體5 d后產(chǎn)生毛狀根,毛狀根可直接從葉片外植體葉脈處產(chǎn)生.感染10d后,約90%的子葉外植體產(chǎn)生毛狀根.毛狀根能在無外源生長調(diào)節(jié)劑的MS固體和液體培養(yǎng)基上自主生長.PCR擴增結(jié)果證實,發(fā)根農(nóng)桿菌Ri質(zhì)粒的rolB和rolC基因已在黃瓜毛狀根基因組中整合并得到表達.挑選一無菌黃瓜毛狀根系置于含不同濃度6-BA的MS培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)來探討細胞分裂素6-BA對黃瓜毛狀根生長及其形態(tài)變化的影響.結(jié)果表明,細胞分裂素6-BA能促進黃瓜毛狀根的生長及改變其生長形態(tài).隨著培養(yǎng)基中6-BA濃度的升高,黃瓜毛狀根變得越來越短而粗,更少分枝.與對照相比,培養(yǎng)基中添加0.1~3.0 mg/L 6-BA能推遲毛狀根最大生長峰的出現(xiàn),降低其可溶性蛋白含量、SOD和POD酶活性;而黃瓜毛狀根的乙烯釋放高峰比其最大生長峰和SOD和POD酶活性高峰提前5天,但6-BA處理能降低毛狀根的內(nèi)源乙烯釋放量.該結(jié)果表明細胞分裂素6-BA可能通過對乙烯生成和釋放的調(diào)節(jié)來影響黃瓜毛狀根的生長和形態(tài)并延緩毛狀根的衰老.
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