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轉蘇云金桿菌毒蛋白基因玉米植株的獲得及其抗蟲性分析
玉米( Zea mays L.)轉化成功與否與基因型密切相關.在轉化過程中,除少數模式品種能夠形成再生頻率較高且易轉化的Ⅱ型愈傷組織外,大多數栽培品種往往只能夠形成再生頻率較低且不易轉化的Ⅰ型愈傷組織.因此探索Ⅰ型愈傷組織的誘導及其轉化條件,提高轉化效率,對直接改良玉米優良自交系具有重要意義.應用基因槍轉化技術將蘇云金桿菌( Bacillus thuringiensis ) cry1Ac3基因導入玉米優良自交系E28及340的Ⅰ型胚性愈傷組織中,經過膦絲菌素(PPT)或潮霉素(HygB)篩選,獲得了再生植株.經PCR檢測、Southern blot分析及Bt毒蛋白ELISA檢測證實,外源基因已整合到玉米基因組中,并已獲得表達.抗蟲性分析結果表明,部分轉基因玉米植株對玉米螟蟲有較強的抗性.還比較了PPT和HygB兩種篩選劑的篩選效果,表明PPT篩選的抗性愈傷組織的再生頻率要高于HygB篩選的再生頻率.
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