重組融合蛋白GX1-rmhTNFα的克隆、表達(dá)及鑒定

時(shí)間:2023-04-30 05:12:03 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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重組融合蛋白GX1-rmhTNFα的克隆、表達(dá)及鑒定

目的:構(gòu)建胃癌新生血管導(dǎo)向性肽GX1與新型人腫瘤壞死因子(GX1-rmhTNF)基因的原核表達(dá)載體,表達(dá)GX1-rmhTNF蛋白.方法:利用基因工程方法將胃癌血管特異性結(jié)合肽融合在新型人腫瘤壞死因子α的氨基末端,構(gòu)建GX1-rmhTNF原核表達(dá)載體,在大腸桿菌進(jìn)行表達(dá).對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行SDS-PAGE電泳分析和Western blot檢測分析.結(jié)果:成功構(gòu)建了GX1-rmhTNF重組融合表達(dá)質(zhì)粒,表達(dá)的蛋白經(jīng)SDS-PAGE電泳分析,在相對(duì)分子質(zhì)量(Mr)約18 000處出現(xiàn)了1條新生的蛋白條帶,該表達(dá)蛋白具有與TNFα單克隆抗體特異性的結(jié)合能力.結(jié)論:成功構(gòu)建了GX1-rmhT-NF基因的原核表達(dá)載體并在原核細(xì)胞中表達(dá)了該產(chǎn)物,為下一步GX1-rmhTNF的純化奠定了基礎(chǔ).

作 者: 曹珊珊 吳開春 顏真 萬一 韓宇 趙麗娜 樊代明 CAO Shan-shan WU Kai-chun YAN Zhen WAN Yi HAN Yu ZHAO Li-na FAN Dai-ming   作者單位: 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院消化內(nèi)科,腫瘤生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西,西安,710032  刊 名: 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志  ISTIC PKU 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年,卷(期): 2006 22(3)  分類號(hào): Q78  關(guān)鍵詞: 噬菌體肽段CGNSNPKSC/GX1   GX1-rmhTNFα   重組融合蛋白/表達(dá)   溫度誘導(dǎo)  

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