Candida rugosa脂肪酶同工酶的分離及選擇固定化

Candida rugosa脂肪酶同工酶的分離及選擇固定化

采用"界面親和層析",從商品Candida rugosa脂肪酶(CRL)中分離到三個同工酶(CRL-1、CRL-2和CRL-3),它們在水-有機溶劑雙液相體系中催化(R,S)-萘普生甲酯的不對稱水解反應,具有不同的立體選擇性.分析表明:CRL-1和CRL-2上不同程度地非共價結合有小分子的酸性化合物,阻礙了其活性位點處疏水腔的完全開放;CRL-3上不含有該小分子酸性化合物,活性位點處疏水腔可處于完全開放構象.據此分別將CRL同工酶選擇性地固定在不同的載體(GDX101和YWG-NH2)上.通過簡單易行的選擇吸附步驟,可同時達到同工酶的分離及固定化目的,提出了一種對結構上相差不大同工酶分離的便利方法.

作 者： 辛嘉英 徐毅 李樹本 王來來 XIN Jia-Ying XU Yi LI Shu-Ben WANG Lai-Lai   作者單位： 中國科學院蘭州化學物理研究所,羰基合成與選擇氧化國家重點實驗室,蘭州,730000  刊 名： 生物化學與生物物理進展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(5)  分類號： Q556  關鍵詞： CRL同工酶   分離   界面親和層析   選擇性固定化  

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