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絲瓜籽核糖體失活蛋白luffin-a的克隆表達及其cDNA序列分析
目的: 從絲瓜籽中克隆核糖體失活蛋白luffin-a 基因,并在原核系統(tǒng)進行表達.方法: 根據(jù)已報道的cDNA 序列設計引物,用RT-PCR 的方法從成熟的絲瓜籽中克隆luffin-a 基因,克隆后鑒定核苷酸序列.構建表達載體pET-28a(+)-luffin-a,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21 (DE3) ,并經(jīng)IPTG 誘導表達.利用金屬離子親和層析的方法純化所得目的蛋白.結果: 克隆的luffin-a 基因及其所編碼的氨基酸序列與國外報道的核苷酸序列及氨基酸序列同源性分別為95%和92% ,因而所獲得的luffin-a基因是絲瓜籽核糖體失活蛋白luffin-a一個新的cDNA序列.經(jīng)SDS-PAGE分析: luffin-a 主要存在于包涵體中.金屬離子親和層析可純化目的蛋白.結論: 本研究成功地克隆了luffin-a 一個新的序列,并建立了該蛋白的原核表達系統(tǒng),同時利用親和層析可一步法純化獲得目的蛋白.
作 者： 王怡 孫萍 詹林盛 宋麗潔 李暉 孫紅琰 WANG Yi SUN Ping ZHAN Lin-Sheng SONG Li-Jie LI Hui SUN Hong-Yan 作者單位： 軍事醫(yī)學科學院野戰(zhàn)輸血研究所,北京,100850 刊 名： 軍事醫(yī)學科學院院刊 ISTIC PKU 英文刊名： BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES 年，卷(期)： 2006 30(4) 分類號： Q523 關鍵詞： 核糖體 luffin-a 序列分析,DNA 金屬離子親和層析 基因表達【絲瓜籽核糖體失活蛋白luffin-a的克隆表達及其cDNA序列分析】相關文章：
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