林麝IL-2細胞因子的克隆、表達和純化

林麝IL-2細胞因子的克隆、表達和純化

用林麝( Moschus berezovskii)外周血單核細胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)提取總RNA,RT-PCR擴增IL-2(interleukin-2, IL-2),連接pMD18-T載體后轉化大腸桿菌,篩選陽性克隆并測序.然后將IL-2成熟肽編碼序列連接到pGEX4T-1原核表達載體進行表達、純化.結果表明林麝IL-2開放閱讀框全長468 bp,編碼155個氨基酸.序列分析表明,林麝IL-2及其受體結合域與水牛的高度保守,而在翻譯后修飾的預測活性位點上和水牛的有所不同.IPTG誘導林麝IL-2蛋白表達,得到約41 kD的目標帶;優化表達后,林麝IL-2表達含量達到了總蛋白量的25%.經GST親和柱分離純化,得到了約41 kD的單一目標帶,這說明林麝IL-2基因的原核表達成功.

作 者： 賴彬 徐柳 岳碧松 鄒方東 LAI Bin XU Liu YUE Bi-song ZOU Fang-dong   作者單位： 賴彬,岳碧松,鄒方東,LAI Bin,YUE Bi-song,ZOU Fang-dong(生物資源與生態環境教育部重點實驗室,四川大學生命科學院,成都,610064)

徐柳,XU Liu(生物資源與生態環境教育部重點實驗室,四川大學生命科學院,成都,610064;西南交通大學生物工程學院) 

刊 名： 四川動物  ISTIC PKU 英文刊名： SICHUAN JOURNAL OF ZOOLOGY  年，卷(期)： 2006 25(4)  分類號： Q95  關鍵詞： 林麝白介素-2   克隆   原核表達  

【林麝IL-2細胞因子的克隆、表達和純化】相關文章：

重組幽門螺桿菌AhpC基因的克隆表達及其初步純化04-26

一只林麝的自述作文600字12-11

陜西省家養林麝資源現狀與分析研究04-26

描寫麝的詩句11-27

PCR產物靶向克隆法構建pET15b-CAT及His-tag-CAT融合蛋白的表達與純化04-27

GST-talin1融合蛋白的原核表達及純化04-27

酸弗林蛋白酶酸性氨基酸簇分選蛋白-1的原核表達、純化及多克隆抗體制備04-27

大腸桿菌RNaseⅢ基因的克隆與表達04-26

糞腸球菌Ace重組蛋白的表達、純化及黏附活性研究04-27

基因重組BDNF蛋白在大腸桿菌中的表達純化與功能鑒定04-26