人血管內皮生長因子和端粒酶催化亞基復合調控序列的構建及轉錄活性的研究

人血管內皮生長因子和端粒酶催化亞基復合調控序列的構建及轉錄活性的研究

以人肝癌細胞基因組DNA為模板,應用PCR方法擴增VEGF增強子和hTERT核心啟動子序列,該序列與NCBI數據庫參考序列相比,同源性達到99%以上.將VEGF增強子和hTERT核心啟動子定向克隆到pBluescript Ⅱ SK載體中,構建VEGF增強子和hTERT核心啟動子復合調控序列.酶切去除表達載體pECFP-C1的啟動子CMV,并將所制備的復合調控序列連接到CMV位置,構建含該復合調控序列并可表達綠色熒光蛋白報告基因的重組質粒,轉染人肺癌細胞和正常人肝細胞.結果顯示,在人肺癌細胞中觀察到綠色熒光,而在人肝細胞中沒有檢測到.由此說明,具有腫瘤特異性的VEGF增強子和hTERT核心啟動子復合轉錄調控序列可以驅動綠色熒光蛋白基因在人肺癌細胞中表達,但不能驅動該蛋白在正常人肝細胞中表達.

作 者： 胡薇 郝軍元 艾永興 張英波 張玉靜 HU Wei HAO Jun-yuan AI Yong-xing ZHANG Ying-bo ZHANG Yu-jing   作者單位： 胡薇,HU Wei(吉林大學農學部畜牧獸醫學院動物生物技術系,長春,130062;吉林農業大學生物技術學院,長春,130118)

郝軍元,艾永興,張英波,張玉靜,HAO Jun-yuan,AI Yong-xing,ZHANG Ying-bo,ZHANG Yu-jing(吉林大學農學部畜牧獸醫學院動物生物技術系,長春,130062) 

刊 名： 吉林農業大學學報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF JILIN AGRICULTURAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 28(2)  分類號： Q786  關鍵詞： VEGF增強子   hTERT核心啟動子   綠色熒光蛋白   表達  

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