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細菌內同源重組法制備FMDV聚蛋白編碼基因重組腺病毒
采用PCR方法從重組質粒pMD18-T/PP中擴增出FMDV的聚蛋白(PP)編碼基因,再亞克隆至腺病毒穿梭質粒中,形成重組穿梭質粒rpAd-CMV/PP;將獲得的重組穿梭質粒與腺病毒骨架載體通過在大腸桿菌內質粒間同源重組獲得重組腺病毒質粒rpAd/PP.將腺病毒載體線性化后用脂質體介導轉染293細胞從而獲得含有口蹄疫病毒PP編碼基因的重組腺病毒.通過倒置顯微鏡觀測,可見明顯的細胞病變,利用熒光顯微鏡可觀測到報告基因綠色熒光蛋白的表達,并在電鏡下觀察到FMDV的空衣殼.結果證明已成功獲得了含有口蹄疫病毒PP編碼基因的重組腺病毒rAd/PP,并成功表達組裝FMDV空衣殼,為FMDV腺病毒活載體疫苗的研究奠定了基礎.
作 者： 張興旺 王勤 柳紀省 殷相平 李志勇 ZHANG Xing-wang WANG Qin LIU Ji-xing YIN Xiang-ping LI Zhi-yong 作者單位： 張興旺,ZHANG Xing-wang(中國農業科學院蘭州獸醫研究所,家畜疫病病原生物學國家重點實驗室,農業部畜禽病毒學重點開放實驗室,蘭州,730046;蘭州大學生命科學學院,蘭州,730000;甘肅省人民醫院檢驗中心,蘭州,730000)王勤,WANG Qin(蘭州大學生命科學學院,蘭州,730000)
柳紀省,殷相平,李志勇,LIU Ji-xing,YIN Xiang-ping,LI Zhi-yong(中國農業科學院蘭州獸醫研究所,家畜疫病病原生物學國家重點實驗室,農業部畜禽病毒學重點開放實驗室,蘭州,730046)
刊 名： 微生物學報 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MICROBIOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 2006 46(2) 分類號： Q786 S852 關鍵詞： FMDV 聚蛋白 編碼基因 同源重組 重組腺病毒 空衣殼【細菌內同源重組法制備FMDV聚蛋白編碼基因重組腺病毒】相關文章：
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