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人VEGF基因轉染大鼠骨髓間充質干細胞的實驗研究
目的:建立人血管內皮生長因子165(hVEGF165)基因轉染大鼠骨髓間充質干細胞的方法.方法:采用密度梯度離心-貼壁培養法獲Wistar大鼠骨髓間充質干細胞(MSCs),測定其生長曲線和表面標志CD34,CD44,CD45及SH3,檢測其向成骨細胞及脂肪細胞誘導分化潛能后;用脂質體介導法將pcDNA3.1-hVEGF165導入MSCs,觀察轉染后細胞形態和生長狀況,通過RT-PCR,Western blot和ELISA鑒定VEGF在MSCs中的表達情況.結果:大鼠MSCs經檢測為CD44和SH3陽性,CD45和CD34陰性,可誘導分化為成骨細胞和脂肪細胞;經RT-PCR,Western和ELISA檢測證實陽離子脂質體能成功地將hVEGF165轉染至大鼠MSCs,并獲得有效的表達.結論:真核表達載體pcDNA3.1-VEGF165在MSCs中獲有效表達.
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