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HeLa細胞端粒酶的分離純化及其蛋白質(zhì)組分的研究
根據(jù)端粒酶含有蛋白質(zhì)組分和RNA組分的特點,采用寡核苷酸親和純化法從HeLa細胞蛋白粗提物中分離純化人類端粒酶,純化產(chǎn)物以TRAP法檢測其延伸端粒活性,并采用RNA印跡法進行鑒定,然后從純化產(chǎn)物中分離蛋白質(zhì)組分,以SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測其蛋白質(zhì)亞基成分,可見到4種蛋白質(zhì)亞基成分,與蛋白質(zhì)分子質(zhì)量標準比較,有兩條位置接近212.2 ku,一條接近116.0 ku,一條接近42.7 ku.結(jié)果表明,蛋白質(zhì)寡核苷酸親和純化法一步性分離純化HeLa細胞端粒酶可得到端粒酶活性片段.
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