用于篩選COPS3相互作用蛋白酵母雙雜交誘餌載體pGBKT7-COPS3

時間:2023-04-27 21:34:56 生物醫學論文 我要投稿
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用于篩選COPS3相互作用蛋白酵母雙雜交誘餌載體pGBKT7-COPS3的構建及鑒定

目的 用COP島基因片段構建酵母雙雜交GAL4系統的誘餌載體pGBKT7-COPS3,并檢測其表達產物對酵母細胞有無毒性及對報告基因有無激活作用.方法 運用RT-PCR技術從骨肉瘤細胞系SOSP-9607中擴增出COPS3基因片段,克隆入pUC19質粒,經測序正確后,插入酵母雙雜交誘餌載體pGBKT7中,將重組質粒導入酵母菌AH109,檢測其表達產物在酵母細胞中對報告基因有無激活作用.結果 成功獲得COPS3基因片段,其表達蛋白對酵母菌AH109無毒性,對報告基因亦無激活作用.結論 可以利用酵母雙雜交GAL4系統來研究與COPS3相互作用蛋白.

作 者: 蘇海川 趙玉紅 陳軍 張偉 李陜區   作者單位: 蘇海川,陳軍,李陜區(第四軍醫大學唐都醫院中心實驗室,西安,710038)

趙玉紅(第四軍醫大學基礎部免疫學教研室)

張偉(第四軍醫大學基礎部微生物學教研室) 

刊 名: 山西醫科大學學報  ISTIC 英文刊名: JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY  年,卷(期): 2007 38(7)  分類號: Q781  關鍵詞: 基因,COPS3   酵母雙雜交系統   報告基因  

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