轉擬南芥AtKup1基因高含鉀量煙草獲得

轉擬南芥AtKup1基因高含鉀量煙草獲得

提取擬南芥幼根總RNA,進行RT-PCR逆轉錄,產物測序,將其構建到含Km(帶內含子)篩選標記的植物雙元表達載體上,根癌農桿菌介導法將AtKup1基因導入煙草,對轉化子進行PCR擴增、GUS染色、Southern雜交和AtKup1基因mRNA熒光定量PCR分析,并進行煙葉內在成分化驗分析.PCR獲得2100bp左右擴增產物,測序結果證實擴增產物序列與擬南芥AtKup1基因(Genbank No:AF029876)一致;得到GUS染色陽性的AtKup1基因轉化煙草材料29株.經PCR擴增、分子雜交檢測證實AtKup1基因已整合到轉基因煙草的基因組,熒光定量PCR分析可以在幼根中檢測到AtKup1基因的mRNA轉錄.煙葉含鉀量化驗結果表明導入的AtKup1基因在轉化材料中成功表達,使煙葉含鉀量提高約45%.

作 者： 郭兆奎 楊謙 姚泉洪 萬秀清 顏培強 GUO Zhao-kui YANG Qian YAO Quan-hong WAN Xiu-qing YAN Pei-qiang   作者單位： 郭兆奎,楊謙,GUO Zhao-kui,YANG Qian(哈爾濱工業大學生命科學與工程系,哈爾濱,150001)

姚泉洪,YAO Quan-hong(上海市農業科學院生物技術中心,上海,201106)

萬秀清,顏培強,WAN Xiu-qing,YAN Pei-qiang(黑龍江省煙草科學研究所,牡丹江,157011) 

刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2005 25(12)  分類號： Q81  關鍵詞： AtKup1基因   轉基因煙草   K+含量  

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