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漢灘病毒G1S0.7嵌合基因重組腺病毒的構(gòu)建及鑒定
目的在本室前期工作的基礎(chǔ)上構(gòu)建漢灘病毒M基因G1片段與S基因0.7kb片段嵌合基因的重組腺病毒.方法構(gòu)建含有漢灘病毒G1S0.7嵌合基因的轉(zhuǎn)移載體pShuttle-G1S0.7,然后通過(guò)特異性的酶切將嵌合基因與腺病毒DNA相連,電轉(zhuǎn)化E.coli JM109,獲得重組腺病毒Adeno-G1S0.7 DNA,轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞得到重組腺病毒.進(jìn)一步對(duì)重組腺病毒的滴度和表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行鑒定.結(jié)果構(gòu)建的含G1S0.7嵌合基因的重組腺病毒,滴度可達(dá)1013～1015PFU/L;該重組腺病毒感染Vero-E6細(xì)胞后,表達(dá)出可被抗?jié)h灘病毒核蛋白及糖蛋白G1的特異性單抗(mAb)所識(shí)別的融合蛋白.結(jié)論利用腺病毒表達(dá)系統(tǒng),成功地表達(dá)同時(shí)具有核蛋白及糖蛋白G1生物學(xué)活性的融合蛋白,為進(jìn)一步研究其免疫學(xué)特性奠定了基礎(chǔ).
作 者： 張芳琳 劉勇 于瀾 胡剛 吳興安 史夢(mèng)遠(yuǎn) 白文濤 王海濤 徐志凱 ZHANG Fang-lin LIU Yong YU Lan HU Gang WU Xing-an SHI Meng-yuan BAI Wen-tao WANG Hai-tao XU Zhi-kai 作者單位： 第四軍醫(yī)大學(xué)微生物學(xué)教研室,西安,710032 刊 名： 免疫學(xué)雜志 ISTIC PKU 英文刊名： IMMUNOLOGICAL JOURNAL 年，卷(期)： 2006 22(2) 分類號(hào)： Q78 關(guān)鍵詞： 漢灘病毒 嵌合基因 重組腺病毒【漢灘病毒G1S0.7嵌合基因重組腺病毒的構(gòu)建及鑒定】相關(guān)文章：
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