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毒性小分子蜂毒肽基因的克隆修飾、融合載體構(gòu)建及表達研究
通過定點誘變的方法,對小分子蜂毒肽(melittin)基因進行修飾,引入了羥胺裂解位點,使蜂毒肽與其前體蛋白得以在體外融合表達.將融合的蜂毒肽前體蛋白(premelittin)經(jīng)雙酶切后克隆到原核表達載體PET-42a(+)中,PCR鑒定后轉(zhuǎn)化至宿主菌BL21(DE3)中,在異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導下,在大腸桿菌中實現(xiàn)融合表達.為利用基因工程的方法表達毒性小分子多肽、實現(xiàn)該類藥物的產(chǎn)業(yè)化打下基礎.
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