利用煙草表達人凝血Ⅸ因子(hFIX)的研究

利用煙草表達人凝血Ⅸ因子(hFIX)的研究

血友病B是凝血Ⅸ因子(hFIX)缺乏所導致的一種出血性疾病,通過輸血和hFIX濃縮劑進行治療療效顯著,但存在治療費用高和安全隱患,因而獲得安全、廉價的人凝血Ⅸ因子對血友病B治療具有重要意義.植物系統表達外源蛋白在生產成本和安全性方面具有優勢.為此,構建含人凝血Ⅸ因子基因(hFIX,2.8kb)植物雙元表達載體p35s-2300∷gus∷noster,用農桿菌介導法轉化煙草"百日紅",通過PCR和Southern blot分析證實獲得4株獨立轉基因植株,hFIX在轉基因煙草基因組中的拷貝數為1～4個;RT-PCR和ELISA檢測結果表明,hFIX在轉錄和翻譯水平已成功表達,hFIX在轉基因煙草葉片中的表達量為2.5～8.8ng/g·FW,并具有免疫活性.為利用植物系統表達hFIX的后續研究作了必要準備,也為利用植物系統表達其他藥用蛋白研究提供了一些理論和實驗參考.

作 者： 趙凌俠 張凌 魏捷 開國銀 李柱剛 錢虹妹 張慧 唐克軒 ZHAO Ling-xia ZHANG Ling WEI Jie KAI Guo-yin LI Zhu-gang QIAN Hong-mei ZHANG Hui TANG Ke-xuan   作者單位： 趙凌俠,張凌,魏捷,錢虹妹,張慧,唐克軒,ZHAO Ling-xia,ZHANG Ling,WEI Jie,QIAN Hong-mei,ZHANG Hui,TANG Ke-xuan(上海交通大學植物生物技術研究中心,上海,200030)

開國銀,KAI Guo-yin(上海交通大學植物生物技術研究中心,上海,200030;上海師范大學生命與環境科學學院,上海,200234)

李柱剛,LI Zhu-gang(上海交通大學植物生物技術研究中心,上海,200030;黑龍江省農業科學院生物技術研究中心,哈爾濱,150086) 

刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號： Q81  關鍵詞： 人凝血Ⅸ因子   煙草  

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