嗜肺軍團菌lvgA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達

嗜肺軍團菌lvgA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達

本實驗采用聚合酶鏈反應(PCR)從嗜肺軍團菌基因組DNA中擴增得到軍團菌毒力基因(Legionella virulence gene,lvg A gene),并將其定向連接入克隆載體pUC18,構建重組質粒pUlvgA,重組子經限制性內切酶分析、聚合酶鏈式反應及測序鑒定后,再將lvgA基因亞克隆至原核表達載體pGEX-4T-1,構建原核表達重組質粒pGlvgA,轉化宿主菌JM109,IPTG誘導表達,產物進行SDS-PAGE電泳、免疫印記分析鑒定.實驗結果表明,成功擴增出627 bp的lvgA基因,構建了重組質粒pUlvgA及原核表達重組質粒pGlvgA,并使53.7 KDa 的GST-lvgA融合蛋白質在原核系統中得到了有效的表達.

作 者： 劉明杰 陳建平 廖濤 蘆殿香 陳憲 Liu Mingjie Chen Jianping Liao Tao Lu Dianxiang Chen Xian   作者單位： 四川大學,華西基礎醫學與法醫學院,寄生蟲學教研室,形態學實驗室,成都,610041  刊 名： 生物醫學工程學雜志  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF BIOMEDICAL ENGINEERING  年，卷(期)： 2006 23(3)  分類號： Q78  關鍵詞： 軍團菌   lvgA基因   聚合酶鏈式反應   基因表達  

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