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水稻OsRhoGDI2蛋白生物信息學(xué)分析及亞細胞定位研究
水稻OsRhoGDI2是通過酵母雙雜交篩選到的小G蛋白Rho家族成員OsRacD的互作蛋白的編碼基因,為研究OsRhoGDI2和OsRacD的相互作用特點和調(diào)控機制,對OsRhoGDI2進行了生物信息學(xué)分析和亞細胞定位檢測.通過生物信息學(xué)方法比較了二者編碼蛋白的理化性質(zhì)、修飾位點和亞細胞定位特點,并進一步構(gòu)建了受控于CaMV35S啟動子的與綠色熒光蛋白融合表達的OsRhoGDI2基因的雙元植物表達載體,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細胞,通過熒光顯微鏡觀察了融合蛋白在活細胞內(nèi)分布特點.OsRhoGDI2和OsRacD具有一些相似的理化特性和翻譯后修飾位點,在洋蔥表皮細胞中,OsRhoGDI2主要分布在細胞質(zhì)、細胞膜和細胞核.OsRhoGDI2與OsRacD在蛋白理化特性和胞內(nèi)分布上存在一定的相關(guān)性,OsRhoGDI2蛋白可能在調(diào)控OsRacD的胞內(nèi)分布和活性中發(fā)揮重要作用.
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