用免疫熒光技術(shù)檢測細胞培養(yǎng)物中兔出血癥病毒

用免疫熒光技術(shù)檢測細胞培養(yǎng)物中兔出血癥病毒

用本所實驗室制備的兔出血癥病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)高免血清,按常規(guī)方法提純出抗體(IgG),用異硫氰酸熒光素(FITC)標記IgG.在細胞培養(yǎng)時,培養(yǎng)瓶中放入玻片,當細胞長成單層時,按常規(guī)方法接種病毒液,培養(yǎng)24、48、96、120h時取出玻片,用熒光抗體染色,在熒光顯微鏡下觀察不同代次的細胞毒.經(jīng)觀察:兔腎上皮細胞(RK)毒培養(yǎng)到36～48h、羊睪丸細胞(ST)毒培養(yǎng)到72～96h時可觀察到特異性熒光,隨著培養(yǎng)時間的延長.熒光亮度增強,胞漿內(nèi)充滿特異性熒光.用肝組織強毒病料觸片,呈特異性熒光,對照細胞培養(yǎng)48h無熒光出現(xiàn),證實了兩株細胞培養(yǎng)物中有大量的兔出血癥病毒存在,從而成功的分離培養(yǎng)出了兔出血癥病毒細胞毒.

作 者： 薛掌林 張述斌 康文彪 XUE Zhang-lin ZHANG Shu-bin KANG Wen-biao   作者單位： 甘肅省畜牧獸醫(yī)研究所,平?jīng)?744000  刊 名： 中國養(yǎng)兔  英文刊名： CHINESE JOURNAL OF RABBIT FARMING  年，卷(期)： 2009 ""(1)  分類號： S858.291  關(guān)鍵詞： 免疫熒光技術(shù)   羊睪丸細胞   兔腎上皮細胞   兔出血癥病毒  

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